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发布时间:2020-10-26 05:52:15
武汉赛尔夫科技有限公司是一家***的色谱仪器和色谱消耗品的生产商和供应商。我们一直致力于色谱分析和色谱分离纯化技术研究,公司产品包括分析型液相色谱仪,半制备、制备型液相色谱仪。
液相色谱按其固定相的性质可分为凝胶色谱,疏水性液相色谱,反相液相色谱离子交换液相色谱,亲和液相色谱以及聚焦液相色谱等类型。用不同类型的液相色谱分离或分析各种化合物的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理相似。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。其不同之处是液相色谱灵敏,快速,分辨率高,重复性好,且须在色谱仪中进行。
离子对色谱法是将一种 ( 或多种 ) 与溶质分子电荷相反的离子 ( 称为对离子或反离子 ) 加到流动相或固定相中,使其与溶质离子结合形成疏水型离子对化合物,从而控制溶质离子的保留行为。要正确地选择色谱分离方法,首先必须尽可能多的了解样品的有关性质,其次必须熟悉各种色谱方法的主要特点及其应用范围。其原理可用下式表示:X水相Y-水相 === X Y-有机相式中:X 水相--流动相中待分离的有机离子(也可是阳离子);Y-水相--流动相中带相反电荷的离子对(如氢氧化四丁基铵、氢氧化十六******铵等);X Y---形成的离子对化合物。当达平衡时:KXY = [X Y-]有机相/[ X ]水相[Y-]水相根据定义,分配系数为:DX= [X Y-]有机相/[ X ]水相= KXY [Y-]水相
液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、、***代谢产物、表面活性剂,剂、***、除莠剂的分析等物质的分析。通常用厚壁玻璃管或内壁抛光的不锈钢管制作的,对于一些有腐蚀性的样品且要求耐高压时,可用铜管、铝管或聚四氟乙烯管。高压泵HPLC使用的色谱柱是很细的(1~6 mm),所用固定相的粒度也非常小(几μm到几十μm),所以流动相在柱中流动受到的阻力很大,在常压下,流动相流速十分缓慢,柱效低且费时。为了达到快速、分离,必须给流动相施加很大的压力,以加快其在柱中的流动速度。为此,须用高压泵进行高压输液。高压、高速是液相色谱的特点之一。HPLC使用的高压泵应满足下列条件:a. 流量恒定,无脉动,并有较大的调节范围(一般为1~10 mL/min);b. 能抗溶剂腐蚀;c. 有较高的输液压力;对一般分离,60×10^5Pa的压力就满足了,对分离,要求达到150~300×10^5Pa。
流动相的选择除了和分析色谱同样的考虑外,在选用流动相时,要考虑色谱分离后面加有旋转蒸发等二次分离操作。液相色谱所用基本理论:塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致,但由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相,而液体和气体的性质不相同。一般来说,不宜采用高毒性溶剂,对多元溶剂要尽可能的少用。如果产品中含有大量溶剂,溶剂的纯度也要考虑在其中。组分保留时间的估计用分析柱子在同等色谱条件下(同样的固定相和流动相)测定保留时间后,按照单一组分的线流速(不是体积流速)一定,通过计算可以知道组分的大致保留时间区域。分析谱图的峰形状,对确定保留时间也有很大的参考价值。
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